Aislamiento y caracterización bioquímica de proteínas Citotóxicas (Lectinas) de semillas de Lupinus Mutabilis Sweet «Tarwi».

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Fecha
2016
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Editor
Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa
Resumen
El presente trabajo de investigación fue realizado en el Laboratorio de Química Biológica de la Escuela Profesional y Académica de Biología de la Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa. Se aisló y caracterizó bioquímicamente una lectina extraída a partir de semillas de Lupinus mutabilis “tarwi”, adquiridas del Departamento de Cusco, Perú. La lectina de semillas de Lupinus mutabilis “Tarwi” (LuMLEC) fue purificada y caracterizada a través de extracción salina, cromatografía de exclusión molecular en Sephadex G-75 y a través de cromatografía en HPLC de fase reversa. El análisis en SDS-PAGE demostró que la lectina purificada era homogénea ya que ésta presentó una sola banda de proteína correspondiente a un tamaño molecular de 17250 Da. El estudio acerca de la actividad hemaglutinante de la lectina de Lupinus mutabilis “Tarwi” frente a eritrocitos humanos del sistema ABO, es capaz de aglutinar solo los tipos sanguíneos “A” y “AB”, presentando una selectividad para los grupos “A”, y “AB” Rh (+) a una concentración mínima de 20 g/mL. Esto nos indicaría que la fracción con actividad hemaglutinante (LuMLEC) tiene una gran afinidad por D-Glucosa y Manosa, presente en la superficie de la membrana de eritrocitos del tipo A y AB. Con respecto a la inhibición de la actividad hemaglutinante por carbohidratos sólo la manosa (0,048 mM) y glucosa (0,096 mM) presentaron actividad inhibitoria. El análisis completo de aminoácidos reveló que la LuMLEC es una lectina de naturaleza acida constituida por aminoácidos ácidos al 35,61 %, los básicos 18,18 %, los neutros 17,42% y los hidrofóbicos 16,67 % el aminoácido presente en mayor cantidad corresponde al Acido glutámico (Glu) (29,55%), mientras que la menor le pertenece a la Histidfina (His) cada una con 0,76 %. Posteriormente, aplicándole el análisis del programa DNASTAR se pudo determinar la predicción estructural, su pI que fue de 9,72. La presencia de LuMLEC también inhibe el crecimiento del hongo Fusarium oxysporum; así como de Saccharomyces cerevisiae.
Descripción
Palabras clave
Bioquímica, Lectina, Tarwi, Cromatografía, Hemaglutinante, Proteínas Citotóxicas
Citación